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?微生物乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)ELISA試劑盒實驗使用說明書可能包含以下內(nèi)容?:
BS-0029-WA 微生物乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)ELISA科研試劑盒 96T/48T
BS-0029-WB 微生物乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)ELISA科研試劑盒 96T/48T
?一、實驗原理?
試劑盒采用雙抗體夾心法測定標本中乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)水平。用純化的乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,加入乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA),再與HRP標記的乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物。經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色,TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)呈正相關(guān),用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)濃度?。
?二、試劑盒組成?
試劑盒可能包括說明書、封板膜、酶標包被板、標準品、標準品稀釋液、酶標試劑、樣品稀釋液、顯色劑A液、顯色劑B液、終止液、濃縮洗滌液等?。
?三、操作步驟?
標本采集后盡早進行提取,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存?。
設(shè)置標準品孔和樣本孔,加入不同濃度的標準品和待測樣本?。
加入HRP標記的檢測抗體,封板后溫育?。
洗滌后加入底物顯色,再加入終止液終止反應(yīng)?。
在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)濃度?。
?四、注意事項?
試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用?。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存?。
嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作?。
所有液體組分使用前充分搖勻?。
請注意,由于不同品牌、不同批次的試劑盒可能存在差異,因此具體的使用說明書應(yīng)以實際購買的試劑盒附帶的說明書為準。此外,進行實驗時應(yīng)嚴格遵守實驗室安全規(guī)范,確保實驗人員的安全和實驗結(jié)果的準確性。
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