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微生物法尼基焦磷酸合酶(FPS)ELISA科研試劑盒
發(fā)布時間:2025/3/13瀏覽:73次
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  微生物法尼基焦磷酸合酶(FPS)ELISA試劑盒的實驗使用說明書通常包含以下關鍵信息,以下是一個基于通用ELISA試劑盒說明書的示例:

  BS-5186-A   微生物法尼基焦磷酸合酶(FPS)ELISA科研試劑盒96T

  BS-5186-B   微生物法尼基焦磷酸合酶(FPS)ELISA科研試劑盒48T

  一、實驗目的

  用于測定微生物樣本中法尼基焦磷酸合酶(FPS)的含量,適用于科研試驗。

  二、實驗原理

  試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。用純化的法尼基焦磷酸合酶(FPS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入法尼基焦磷酸合酶(FPS),再與辣根過氧化物酶(HRP)標記的法尼基焦磷酸合酶(FPS)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物。經過洗滌后加底物TMB顯色,TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的法尼基焦磷酸合酶(FPS)含量呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中法尼基焦磷酸合酶(FPS)濃度。

  三、試劑盒組成

  試劑盒通常包含以下組件(以96孔配置為例):

  ?酶標包被板?:1塊(96孔)。

  ?標準品?:1瓶(通常為已知濃度的FPS溶液,用于繪制標準曲線)。

  ?標準品稀釋液?:1瓶。

  ?酶標試劑?:1瓶(含有HRP標記的FPS抗體)。

  ?樣品稀釋液?:1瓶。

  ?顯色劑A液?:1瓶。

  ?顯色劑B液?:1瓶(A液和B液混合后用于顯色反應)。

  ?終止液?:1瓶。

  ?濃縮洗滌液?:1瓶(使用時需稀釋)。

  ?封板膜?:2片。

  ?密封袋?:1個。

  ?說明書?:1份。

  四、樣本收集與處理

  樣本類型包括但不限于血清、血漿、組織勻漿、細胞上清等。收集樣本后,應按要求進行離心、分裝和保存,避免反復凍融。

  五、操作步驟

  從室溫平衡后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃保存。

  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入酶標試劑100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育一定時間(如60min)。

  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置后甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板多次(如5次)。

  每孔加入顯色劑A、B各50μL,37℃避光孵育一定時間(如15min)。

  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

  六、結果計算

  以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線。根據待測樣本的OD值,在標準曲線上查找對應的FPS濃度。

  七、注意事項

  實驗過程中應保持實驗環(huán)境的清潔和衛(wèi)生,避免交叉污染。

  嚴格控制實驗條件,如溫度、時間等,以確保實驗結果的準確性和可重復性。

  使用前應仔細閱讀說明書,并嚴格按照說明書中的操作步驟進行。

  試劑盒應在規(guī)定的保存條件下保存,避免過期使用。

  請注意,不同品牌的微生物法尼基焦磷酸合酶(FPS)ELISA試劑盒在組成和操作步驟上可能略有差異,因此在使用前應仔細閱讀具體品牌的說明書。

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