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人抗DNA酶B抗體(anti-DNaseB)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明
發(fā)布時(shí)間:2025/2/8瀏覽:84次
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  ?人抗DNA酶B抗體(anti-DNaseB)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明主要包括實(shí)驗(yàn)原理、樣本處理、試劑準(zhǔn)備及實(shí)驗(yàn)步驟等?。

  實(shí)驗(yàn)原理:

  人抗DNA酶B抗體(anti-DNaseB)ELISA試劑盒采用ELISA(酶聯(lián)免疫)方法,用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人抗DNA酶B抗體的含量。實(shí)驗(yàn)過程中,通過間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),將樣本加入預(yù)先包被人抗DNA酶B抗體捕獲抗原的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并洗滌后,用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人抗DNA酶B抗體呈正相關(guān),用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度?12。

  樣本處理:

  血清樣本需將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可。血漿樣本則需用EDTA或肝素作為抗凝劑采集。樣本宜在新鮮時(shí)檢測(cè),保存過久可發(fā)生聚合,在ELISA中可使本底加深。凍結(jié)標(biāo)本溶解后,應(yīng)充分混勻,避免氣泡。

  試劑準(zhǔn)備:

  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。標(biāo)準(zhǔn)品需用樣本稀釋液復(fù)溶,并靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)助其溶解。洗滌緩沖液需按一定比例稀釋。檢測(cè)稀釋液A和B以及檢測(cè)溶液A也需按說明書要求準(zhǔn)備?。

  實(shí)驗(yàn)步驟:

  將試劑盒及樣本置于室溫平衡。

  按照說明書要求設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白對(duì)照孔。

  向各孔中加入相應(yīng)量的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本或稀釋液。

  加入檢測(cè)試劑,經(jīng)過溫育和洗滌。

  加入底物顯色,并在規(guī)定時(shí)間內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度。

  根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品孔的吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣本濃度。

  請(qǐng)注意,人抗DNA酶B抗體(anti-DNaseB)ELISA試劑盒主要用于科研方面,不用于臨床診斷,實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)嚴(yán)格遵守說明書要求,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。


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