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人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/1/16瀏覽:143次
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  人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA試劑盒的實驗使用說明書通常包含以下幾個關(guān)鍵部分:產(chǎn)品概述、試劑盒組成、樣本處理、實驗步驟、結(jié)果計算、注意事項以及存儲條件等。以下是一個基于多個來源綜合整理的人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA試劑盒的實驗使用說明書概要:

  一、產(chǎn)品概述

  本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)的含量。采用雙抗體夾心法,通過形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,并利用TMB顯色系統(tǒng)來定量檢測TdT水平。

  二、試劑盒組成

  試劑盒通常包含以下組件:

  酶標(biāo)包被板

  標(biāo)準(zhǔn)品及標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

  酶標(biāo)試劑

  樣品稀釋液

  顯色劑A液和B液

  終止液

  濃縮洗滌液

  封板膜

  密封袋

  說明書

  三、樣本處理

  ?血清?:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

  ?血漿?:使用EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后離心。收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

  ?尿液?:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

  ?組織標(biāo)本?:切割標(biāo)本后稱重,加入PBS(pH7.4)并勻漿。離心后收集上清,分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

  四、實驗步驟

  ?標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:按照說明書要求,在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,并進(jìn)行系列稀釋。

  ?加樣?:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔和待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上加入樣品稀釋液和待測樣品。

  ?溫育?:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

  ?洗滌?:揭掉封板膜,棄去液體,每孔加滿洗滌液后靜置并棄去,重復(fù)5次后拍干。

  ?加酶?:每孔加入酶標(biāo)試劑(空白孔除外)。

  ?再次溫育和洗滌?:重復(fù)溫育和洗滌步驟。

  ?顯色?:每孔加入顯色劑A和B,輕輕震蕩混勻后37℃避光顯色10-15分鐘。

  ?終止?:每孔加終止液終止反應(yīng)。

  ?測定?:以空白孔調(diào)零,在450nm波長下測定各孔的吸光度(OD值)。

  五、結(jié)果計算

  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣品的OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù)即為樣品的實際濃度。

  六、注意事項

  試劑盒從冷藏環(huán)境中取出后應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用。

  濃洗滌液稀釋時如有結(jié)晶析出,可在水浴中加溫助溶。

  各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。

  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  底物應(yīng)避光保存。

  嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

  七、存儲條件

  試劑盒通常應(yīng)存放在2-8℃的冷藏環(huán)境中,避免陽光直射和潮濕。不同批號的試劑組分不得混用。

  請注意,具體實驗步驟和條件可能因試劑盒品牌和型號的不同而有所差異。因此,在實際操作中應(yīng)嚴(yán)格遵循所使用試劑盒的說明書進(jìn)行。


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